CDMO公司浅谈ELISA试剂盒实验问题分析方案

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　　实验问题出现之后找到原因就会很容易解决，今天CDMO公司您带来了技术分享内容。主要是相关ELISA试剂盒实验的一些问题解决，下面一起来看经验讲谈ELISA试剂盒实验问题分析方案：
　　1、阴性样本的吸光度值低于阳性吸光度值原因：
　　可能原因是出现跳孔的现象或酶标板孔中的试剂未充分的混合。解决的办法是注意操作的方法，注意洗涤时的方法、加完试剂后可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30s，混匀液体。
　　2、吸光度值偏高是怎么回事;
　　可能引起的原因有孵育的温度过高、反应的时间过长。相对应的解决办法是调整孵育环境的温度，如无法调整室内的温度，请将显色时间适当的缩短、控制反应时间。
　　3、样品的稀释:
　　样品稀释前、后的样品必须充分混匀，所有试剂在加样前也须摇匀，以保证试验的均一性。
　　ELISA反应是一种敏感性很高的反应，如果血清不稀释，不可避免会产生很强的非特异性反应，出现假阳性。因此，国外检测血清抗体的试剂盒，均规定将血清稀释至适当的倍数，以降低非特异性反应，使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定，以保证试验的灵敏度和特异性。但是，有些用户未能严格按使用说明书操作，如某些产品应取10μl样品进行稀释，个别用户取5μl甚至1μl样品进行稀释，由于吸嘴上不可避免地沾有样品以及微量移液器的精度不够，因此造成样品稀释倍数不准确，检测结果出现问题。
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