配制培养基过程中应该注意什么问题？

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　　配制培养基过程中应该注意什么问题?

　　细胞培养基过滤需要：

　　1、根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。

　　2、注意各种营养物质的浓度及合适配比，保持合适渗透压 。

　　3、将培养基的 pH 控制在适宜的范围之内，以利于不同类型微生物的生长繁殖或代谢产物的积累。

　　4、要注意各种原料的配比，每种培养基的配比合适的配比，可以按照老师的要求去做。

　　5、如需要加热的时候注意时间的把握。

　　步骤：

　　(一)准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。

　　(二)校正pH值：将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8——8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。

　　(三)过滤：将玻璃漏斗置铁架上，再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。

　　(四)分装：将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100——150ml)，塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。

　　(五)灭菌：培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。