消除细胞悬浮就是这么简单

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　　当在生长培养基中进行单悬浮细胞培养时，样本中出现细胞丢失的情况并不少见。当细胞破裂时，它们会释放DNA和碎片，导致细胞**成大团块，使其难以扩张。细胞聚团既可导致细胞凋亡，也可引起细胞死亡。

　　随着更多的细胞死亡并释放碎片，问题将继续恶化。尽可能快地处理或避免细胞聚团将有利于实验的后续结果。

　　悬浮细胞培养的目标是为靶细胞提供尽可能多的生长资源。这包括充足的生长营养和充足的繁殖空间。当细胞**在一起时，它们会相互限制，降低细胞对营养吞吐量，最终影响生长结果。

　　细胞聚团也会导致靶细胞的回收率降低，并且会干扰标记，这也是悬浮细胞标记的成功率不高的原因，某些细胞分析方法，如流式细胞术，需要对细胞进行适当的分离。在流式细胞术中，大量细胞以快速的液流通过机器。这台被称为细胞仪的机器检测不同细胞之间物理特性的差异，并使用荧光灯对它们进行相应的标记。如果细胞通过试管时**在一起，细胞仪将很难准确测量它们的特性。这会导致它们被不正确地分类，并对实验结果产生负面影响。

　　防止细胞聚团的最佳方法之一是了解是什么导致了细胞**，并采取预防措施避免这些事件的发生。培养物中细胞可能**的一些原因包括：

　　1.过度消化-某些用于组织分解的酶，如胰蛋白酶，如果过量使用会导致细胞结块

　　2.环境压力-物理压力和反复的温度变化会导致细胞死亡，从而导致细胞的“粘性”的DNA分子将相邻的细胞连接在一起

　　3.组织分解-在制备单细胞悬浮液时，使用酶、机械或化学分解策略可使细胞破裂，从而导致碎片的聚团。

　　4.过度生长-当细胞在其培养基中密度过大的时候，细胞将开始溶解并释放碎片，碎片中的粘性因子会将细胞**到一起

　　5.污染-某些细菌和真菌病原体导致细胞溶解；结块通常是细胞培养物被污染的迹象

　　6.虽然其中一些是由于实验错误而发生的，但实际也有部分的细胞具有天生的聚团现象，比如大部分的半悬浮细胞， ,等等，半悬浮细胞一般在在整体汇合度70%左右就要进行传代操作了，这样可以降低细胞聚成大团块的风险。

　　1. 在开始实验之前，可以采取一些措施来防止细胞**。例如，一种名为DNA酶I的内切酶可以混合到培养基中，从破裂的细胞中分离DNA。分解这些多余的碎片有助于保持靶细胞生长的空间。然而，dna酶I使用过多会导致细胞突变，最终会影响您的实验效果，所以实在不是逼不得已，不建议使用。