3D培养技术中的问题与回答

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　　在3D培养技术中，可能很多人都会遇到各种各样的问题，那么这些问题最常见的有哪些？又该如何去解决呢？下面我们就来看一看3D培养技术当中的一些问题和回答吧。

　　3D培养技术中的细胞出现死亡或细胞存活率不佳可能原因是什么?

　　研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。胎牛血清使用错误或胎牛血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80℃太久。

　　2 3D培养技术中的细胞冷冻管经解冻后，为什么会发生细胞数目太少的情形?

　　研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少， 大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤， 以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可。

　　3 3D培养技术培养基中丙酮酸钠的作用是什么?

　　丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是，如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。

　　4 什么培养基中可以省去加酚红?

　　酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，(特别是雌激素)。为避免固醇类反应，培养细胞，尤其是哺乳类细胞时，用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时，不使用加有酚红的培养基。

　　5 L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗?它在溶液中不稳定吗?

　　L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的。脱掉氨基后，L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解，但是确切的降解率一直没有最终定论。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成，而氨对于一些细胞具有毒性。

　　6 GlutaGRO-I(corning 25-015-CI)是什么?培养细胞如何利用GlutaGRO-I?这个二肽有多稳定?

　　GlutaGRO-I二肽是一个L-谷氨酰胺的衍生物，其不稳定的alpha-氨基用L-丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽，释放L-谷氨酰胺供利用。GlutaGRO-I二肽非常稳定，即使在121磅灭菌20分钟， GlutaGRO-I二肽溶液有最小的降解，如果在相同条件下，L-谷氨酰胺几乎完全降解。

　　7 Hank’s 平衡盐溶液(HBS)要在空气中使用，不需要CO2培养箱。原因是什么?Hank’s 平衡盐溶液(HBS)和Earle’s平衡盐溶液(EBS)有什么本质的功能差别?

　　HBS和EBS 的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Eagles (2.2g/L)中比在Hanks (0.35g/L) 中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡，以维持溶液的pH值。Eagles液在空气水平的CO2 中，溶液会变碱，Hanks液在CO2培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织，需要用Eagles液，如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织，用Hanks液就可以了。

　　3D培养技术不是任何一个机构或者是一个人都能够弄出来的，他需要有专业的知识以及专业的团队，有专业的团队一起合作才能够完成这一项任务，康宁是一家专业进行3D培养技术的公司，可以去看一看。