抗体药物研发流程图蛋白纯化中出现析出问题的解决方案

ningxueqin

　　在蛋白纯化的过程中，我们常常会遇到各种各样的问题，有的是因为操作中出现问题导致，有的是因为生产环境变动导致，还有一些却是正常的情况。当遇到这些问题的时候，我们可以根据日常总结的一些经验来进行相应的处理。今天，生物就和大家聊聊有关蛋白纯化中出现沉淀的情况分析及其解决办法。
　　一般在遇到这种情况时，我们常常有两种方法来予以处理。
　　方法一：复溶沉淀蛋白。抗体药物研发流程图通过成倍地加入稀释液来稀释重悬蛋白，并加入终浓度为1.5M Nacl和100mlMDTT，摇晃5min后，所得结果就会好很多;
　　这个方法能够解决一部分蛋白洗脱后沉淀的问题，但是由于加入的Nacl和DTT，可能会对之后的实验产生影响，所以需要采用透析法去除后才能继续后续实验;
　　方法二：重新制备蛋白。何种方法为方法一的升级版，再添加缓冲液的时候，使用功能1M Nalc和10%的甘油，而后再通过离心的方式获得上清液，最后再用10ml洗脱缓冲液重悬填料;
　　总的来说，蛋白洗脱后沉淀的现象非常的常见，最主要的原因是蛋白的浓度过高，使得蛋白和蛋白之间相互作用的机会增多而形成蛋白聚合体。所以，一般这个时候我们可以考虑通过稀释来处理。通常，我们可以考虑加入高浓度Nacl、高浓度DTT或甘油的方式来处理。生物为广大用户提供专业的蛋白纯化服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。