药代动力学检测透化组织或细胞与分离的线粒体

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　　1.1. 一般注意事项
　　1. 呼吸量通常与分离线粒体（imt）中的线粒体蛋白量或透化组织（pti；包括渗透肌纤维pfe）中的组织量有关，而在活细胞和渗透细胞中，药代动力学检测每个细胞的O2流量通常是归一化的。需要注意，对每个线粒体蛋白的呼吸通量变化的解释是不同的，每质量的组织是组织特异性，而不是线粒体特异性通量，每百万细胞呼吸通量随细胞大小变化，因此不能比较如血小板和成纤维细胞或心肌细胞。
　　2. 使用人体骨骼肌渗透性纤维（pfe）对进行的呼吸检测结果与imt的数据一致。
　　3. 将电子传递到呼吸系统的不同复合物、三羧酸循环的不同片段和转运体的特定底物，用于特定线粒体通路的功能评估。
　　4. 评估氧化磷酸化的最大能力需要底物组合，以重建生理三羧酸循环功能。
　　5. 很少有关于pfe的研究报道氧通量对不同底物浓度的依赖性，且pfe或pce和imt的直接比较也很少。
　　6. 因为敏感性不同，pce和pti的最佳解偶联剂浓度不能从imt的研究中推断出来。
　　1.2. 透化组织或细胞的优势 (pti、pce)
　　1. 与imt相比，pti需要更少的组织或更少的细胞。使用O2k，每次实验测试仅需1 mg 湿重的心脏纤维，或30万个细胞（成纤维细胞、内皮细胞），在37°C的2 ml舱室中。
　　2. 与优化pti相比，imt的优化可能会花费更多时间。
　　3. 所有类型的线粒体都可以在pti和pce中通过实验获得，即imt制备允许分离不同的线粒体。
　　1.3.分离线粒体 (imt) 的优势
　　1. imt的制备需要分离和研究不同的线粒体亚群。
　　2. imt的混悬液代表组织样本的平均值。
　　3.由于O2扩散到非灌注纤维束中的线粒体，渗透肌纤维呼吸的氧依赖性增加了两个数量级。因此，我们选择imt来进行线粒体氧动力学的研究（小的悬浮细胞也是一个很好的模型）。在对肌肉纤维的研究中，必须严格避免低氧水平。电解产生的O2和H2O2滴定到含有H2O2的MiR06中，增加了O2k舱室内的O2浓度。
　　4. ADP必须在高浓度下加入到pfi中，以达到最大的氧化磷酸化容量，因为扩散限制和线粒体外膜可能发挥不同于imt的屏障功能。