灌流工艺全血、血清、血浆样本在DNA检测过程中的区别

ningxueqin

　　很多的血液类DNA提取试剂盒在适用样本上都会写上全血、血浆、血清均可适用，所以很多老师在做核酸诊断类的实验时，就认为这三种样本都可以使用，选择比较随意，但是得到的结果往往并不尽如人意，那么这三种样本有什么区别，对核酸诊断实验有什么影响呢？
　　简单来说，灌流工艺血浆是全血的一部分，血清是血浆的一部分。全血包括血浆和血细胞（红细胞、白细胞、血小板），血浆包括血清和纤维蛋白原。
　　从核酸诊断的角度来讲，人的基因组DNA更多的存在于白细胞中，而只有少量游离DNA存在于血清中，但如果白细胞大量凋亡，血清中的游离DNA量会有所增加。而具有致病性的病原体核酸大量存在于血清中，几乎不存在于血细胞中。
　　所以，如果是以人的核酸为检验目标，如筛查地中海贫血症，筛查色盲基因等，应该以全血作为实验样本，因为血清和血浆中所含有的人的核酸数量远远少于全血，检测灵敏度会降低很多。
　　而如果是以病原体核酸为检验目标，如检测乙肝感染情况，检测感冒病毒等，则以血清或血浆为实验样本，这会天然地剔除血细胞这种杂质，明显降低核酸提取过程中的难度，有利于提高核酸纯净度，增加检测反应灵敏性和稳定性。
　　而血清和血浆相比，一方面血清中含有更少的纤维蛋白原，一方面血清中的DNA是循环DNA，主要来源于病变组织，所以使用血清作为实验样本，可以更进一步提高样本纯净度，减少蛋白杂质，提高病原体浓度，获得更为灵敏的检测结果。
　　对于试剂盒而言，在相同体系下，样本杂质越少，DNA的提取质量就越高。以GNT系列的血液DNA提取试剂盒为例，如果是以全血为样本，通常每个样本加入的血液量为200ul，得率稳定在3-8ug；但若是进行病毒核酸提取，应血清为样本，每个样本加入的血清量应为150~200ul，相比于血液试剂盒的体系，血清试剂盒的提取效率会提高30%甚至更多。
　　考虑实验目的，谨慎选取样本，会获得更好的实验结果。