抗体亲和力成熟ELISA试剂盒保温的实验要点

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　　很多人觉得ＥＬＩＳＡ试剂盒实验，觉得真简单，无非就是加样，保温，洗涤等操作步骤。可是每次做ＥＬＩＳＡ试剂盒实验，抗体亲和力成熟实验结果相差甚多。现在我们来了解一下ＥＬＩＳＡ实验中保温的实验要点，掌握这些，实验Ｓｏ ｅａｓｙ ！
　　在ＥＬＩＳＡ试剂盒实验中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育（ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ），有人称之为孵育。
　　ＥＬＩＳＡ试剂盒属固相免疫测定，抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例，加入板孔中的标本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会，只有贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程，因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ＥＬＩＳＡ试剂盒反应总是需要一定时间的温育。
　　在ＥＬＩＳＡ试剂盒实验中一般有二次抗原抗体反应，即加标本后和加结合物后，此时反应的温度和时间应按规定的要求，保温容器好是水浴箱，可使温度迅速平衡。各ＬＩＳＡ试剂盒板不应叠在一起。为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿纱布的湿盒中。湿盒应该是金属的，传热容易。如用保温箱，空湿盒应预先放在其中，以平衡温度，这在室温较低时更为重要。加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。如室温高于２０Ｃ，ＥＬＩＳＡ试剂盒板可避光放在实验台上，以便不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
　　ＥＬＩＳＡ试剂盒
　　ＥＬＩＳＡ法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。ＥＬＩＳＡ试剂盒的需要也越来越大。