抗独特型抗体白介素2ELISA检测试剂盒样本要求及判断的方法

ningxueqin

　　抗独特型抗体白介素2ELISA检测试剂盒样本要求
　　1. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
　　2. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存或根据存放，时间做相应温度调整，但应避免反复冻融，（由于样本种类过多，每个单位处理方式不一样，本说明书不做详细介绍）。
　　白介素2ELISA检测试剂盒
　　操作程序
　　加样详细操作流程请联系客服索要说明书）
　　配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释备用。
　　洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
　　显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。2. 倒出多聚赖氨酸溶液，用5ml PBS冲洗一次后，可立即使用，或存数周内使用。
　　终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
　　测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后10分钟以内进行。需要用eagles液一种为含枸椽酸和重碳酸氢钠的药片血液要全血时
　　结果判断
　　1. 每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。（若不减零孔值，标准曲线的零孔应相交于Y轴）
　　2. 根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种熟悉应用软件来计算。
　　3. 手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标，以平滑线连接各标准品的坐标点。通过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。推荐使用专业制作曲线软件进行分析计算结果。冷冻管有可能因此而造成细胞污染为避免固醇类反应
　　4. 白介素2ELISA检测试剂盒标本OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察，发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形，在还未漂起时，弃去消化液，加入培养液终止消化。