细胞工厂收获细胞流程及注意事项

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　　随着生物制药、疫苗、单克隆抗体等行业的快速发展，细胞工厂在大规模细胞培养中的重要性愈加凸显。细胞培养是一项严谨的工作，从细胞生长环境、培养基的加入、细胞收获等方面都有严格把控。

　　在利用细胞工厂收获细胞时要严格按照以下流程操作：

　　1、培养结束后将培养液倒出，使用无钙无镁磷酸盐缓冲液（CMF-PBS）清洗（40-50 ml/层），若有需要重复清洗一次。

　　2、消化：消化液（10-40 ml/层）提前预热。

　　3、收集：1000 rpm 离心5分钟，去除消化液，收集细胞。

　　4、清洗：用CMF-PBS或培养基清洗消化过的培养器。

　　在收获细胞时还要注意以下几点：

　　确保CMF-PBS完全浸过每层培养面，并轻轻前后晃动细胞工厂，将残留的培养液清洗干净。

　　2、消化液平均分布到每层，轻轻前后左右倾斜培养器，确保消化液完全浸过培养面，轻轻拍击培养器帮助细胞从表面脱离。

　　3、对于细胞工厂，由于不能清晰观察中间层的细胞消化状态，建议参照完全相同培养条件下的培养瓶或单层细胞工厂的消化状态。亦可使用专用的多层细胞培养器观察台来观察每层细胞的生长状态。

　　3、若清洗液或者是细胞工厂培养层存在大量细胞，则需要清洗多次或调整细胞消化的操作。

　　4、培养温度的一点点偏差都可能影响到细胞的收获率，需密切关注培养的温度是所设定的温度。